نيو ٽيڪ جي مڪمل طور تي خودڪار نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ ڳولڻ واري مشين

پنج طاقت:
● اوزار nucleic امل extraction ۽ پاڪ قدم سان ترتيب ڏنل
● اوزار الٽراسونڪ ڪڍڻ واري ماڊل سان ترتيب ڏنل
● اوزار مڪمل طور تي خودڪار سان ترتيب ڏنل
● اوزار متغير درجه حرارت وڌائڻ سان ترتيب ڏنل
● اوزار مڪمل طور تي بند ٿيل ريجينٽ کٽ سان ترتيب ڏنل

1. ڇا نيوڪليڪ ايسڊ جي سڃاڻپ ڪندڙ ريجنز کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ جي ضرورت آهي؟
نيوڪليڪ ايسڊ جي سڃاڻپ جو اصول هن ريت آهي: پرائمر جي عمل هيٺ، ڊي اين اي پوليمريس کي ٽيمپليٽ ڊي اين اي/ آر اين اي تي زنجير جي رد عمل کي وڌائڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي (جنهن کي اين اي جي ريورس ٽرانسپشن جي ضرورت هوندي آهي)، ۽ پوءِ جاري ڪيل فلورسنٽ سگنل جي مقدار جو اندازو لڳايو ويندو آهي. ڇا نمونو شامل آهي نيوڪليڪ ايسڊ (DNA/RNA) جو پتو لڳايو وڃي ٿو.

1) نمونا جيڪي نه ڪڍيا ويا آهن يا صاف نه ڪيا ويا آهن انهن ۾ ڪيترائي جزا شامل ٿي سگهن ٿا جيڪي حتمي نتيجن کي متاثر ڪن ٿا: نيوڪليز (جيڪو ٽارگيٽ نيوڪليڪ ايسڊ کي ٽوڙي سگهي ٿو ۽ غلط منفي جو سبب بڻائيندو)، پروٽيز (جيڪو ڊي اين اي پوليمريز کي گهٽائي سگهي ٿو ۽ غلط منفي سبب ڪري سگهي ٿو)، ڳري ڌاتو. لوڻ (جيڪو synthase جي غير فعال ٿيڻ جو سبب ٿئي ٿو ۽ غلط مثبت سبب ٿئي ٿو)، تمام تيزابي يا تمام الڪائن PH (جيڪو رد عمل جي ناڪامي جو سبب بڻجي سگھي ٿو)، نامڪمل RNA (جنهن جي ڪري غلط منفي ريورس ٽرانسڪرپشن ناڪامي جو سبب بڻجي ٿو).

2) ڪجهه نمونن کي سڌو سنئون وڌائڻ ۾ مشڪل آهي: گرام-پازيٽيو ۽ ڪجهه پيراسائٽس، ڇاڪاڻ ته انهن جي ٿلهي سيل جي ڀتين ۽ ٻين ساختن جي ڪري، جيڪڏهن اهي نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ جي عمل ۾ نه ٿا وڃن، نڪرندڙ مفت کٽ ناڪام ٿي سگهي ٿي اهڙي قسم جي لاء. نمونو.

تنهن ڪري، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته ٽيسٽ کٽ يا اوزار چونڊيو جيڪو نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ واري قدم سان ترتيب ڏنل آهي.

2. ڪيميائي اضافي يا جسماني الٽراسونڪ فريگمينٽيشن ڪڍڻ؟
عام طور تي ڳالهائڻ، ڪيميائي استخراج گهڻو ڪري علاج ۽ صاف ڪرڻ تي لاڳو ڪري سگهجي ٿو.جڏهن ته، ٿلهي ڀت واري گرام-مثبت بيڪٽيريا ۽ ڪجهه پرجيز ۾، اهو پڻ آهي ته ڪيميائي اخراج موثر نيوڪليڪ ايسڊ ٽيمپليٽس حاصل نه ڪري سگهي ٿي، نتيجي ۾ غلط منفي تشخيص.ان کان علاوه، ڪيميائي استخراج اڪثر ڪري مضبوط ايجنٽ استعمال ڪري ٿو، جيڪڏهن ايلوشن مڪمل طور تي نه آهي، اهو رد عمل سسٽم ۾ مضبوط الڪلي متعارف ڪرائڻ آسان آهي، نتيجي ۾ غلط نتيجا.

الٽراسونڪ فريگمينٽيشن فزيڪل ڪرشنگ استعمال ڪري ٿي، جيڪا ڪاميابيءَ سان استعمال ڪئي وئي آهي GeneXpert، POCT جي ميدان ۾ هڪ معروف ادارو، انساني استعمال لاءِ، ۽ ڪجهه پيچيده نمونن (جهڙوڪ Mycobacterium tuberculosis) جي نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۾ مڪمل فائدو آهي.

تنهن ڪري، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته هڪ ٽيسٽ کٽ يا اوزار چونڊيو جيڪو نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ واري قدم سان ترتيب ڏنل آهي.۽ اھو بھترين آھي جيڪڏھن ڪو الٽراسونڪ ڪڍڻ وارو ماڊل آھي.

3. دستي، نيم خودڪار ۽ مڪمل طور تي خودڪار؟
اهو مزدور جي قيمت ۽ ڪم جي ڪارڪردگي جو مسئلو آهي.في الحال، پالتو جانورن جي اسپتالون بغير ڪافي اسٽاف، ۽ نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ ڳولڻ هڪ ڪم آهي جيڪو ڪجهه صلاحيتن ۽ تجربو جي ضرورت آهي.ان ۾ ڪو شڪ ناهي ته مڪمل طور تي خودڪار نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ ڳولڻ واري مشين هڪ بهترين انتخاب آهي.

4. مسلسل گرمي پد جي واڌ يا متغير درجه حرارت جي واڌاري؟
ايمپليفڪيشن رد عمل هڪ نيوڪليڪ ايسڊ ڳولڻ واري لنڪ آهي، ۽ هن لنڪ ۾ شامل پيشه ور ٽيڪنالاجي پيچيده آهي.عام طور تي ڳالهائڻ، اينزيميمس استعمال ڪيا ويا آهن نيوڪليڪ اسيد کي وڌائڻ لاء.ايمپليفڪيشن جي عمل ۾، ايمپليفائيڊ فلورسنس سگنل يا ايمبيڊڊ فلورسنس سگنل معلوم ٿئي ٿو.عام طور تي ڳالهائڻ، اڳ ۾ فلورسنس سگنل ظاهر ٿئي ٿو، نموني جي ٽارگيٽ جين مواد کي وڌيڪ.

مستقل گرمي پد جي واڌ ويجهه هڪ مقرر درجه حرارت تي نيوڪليڪ ايسڊ امپليفڪيشن آهي، جڏهن ته متغير درجه حرارت ايمپليفيڪيشن هڪ چڪر واري ايمپليفيڪيشن آهي سختي سان ڊينيٽريشن-اينيلنگ-ايڪسٽينشن جي مطابق.مسلسل گرمي پد جي واڌاري جو وقت ڪيو ويو آهي، جڏهن ته متغير درجه حرارت جي واڌاري جو وقت تمام گهڻو متاثر ٿئي ٿو درجه حرارت جي واڌ ۽ اوزار جي زوال جي شرح (في الحال، ڪيترائي ٺاهيندڙن کي تقريبا 30 منٽن ۾ ايمپليفيشن جي 40 چڪر ڪرڻ جي قابل ٿي ويا آهن).

جيڪڏهن ليبارٽري جون حالتون سٺيون آهن ۽ زوننگ سخت آهي، اهو چوڻ مناسب آهي ته ٻنهي جي وچ ۾ درستگي جو فرق وڏو نه هوندو.تنهن هوندي به، متغير درجه حرارت جي واڌاري نسبتا مختصر وقت ۾ وڌيڪ نيوڪليڪ ايسڊ پروڊڪٽس کي گڏ ڪندي.سخت زوننگ ۽ پروفيشنل ٽريننگ اهلڪارن کان سواءِ ليبارٽرين لاءِ، نيوڪليڪ ايسڊ ايروسول جي رسي جو خطرو وڌيڪ هوندو، ڪوڙو مثبت واقعو هڪ ڀيرو ٿيندو آهي، ۽ جنهن کي ختم ڪرڻ انتهائي مشڪل هوندو آهي.

ان کان علاوه، مسلسل گرمي پد جي ايمپليفڪيشن پڻ غير مخصوص ايمپليفڪيشن لاء وڌيڪ خطرناڪ آهي جڏهن نموني پيچيده آهي (لاڳاپيل رد عمل جي درجه حرارت گهٽ آهي، ۽ واڌ جي درجه حرارت وڌيڪ، بهتر پرائمر بائنڊنگ خاصيت).

جيتري قدر موجوده ٽيڪنالاجي جو تعلق آهي، متغير درجه حرارت وڌائڻ وڌيڪ قابل اعتماد آهي.

5. نيوڪليڪ ايسڊ امپليفڪيشن پراڊڪٽس جي رسي جي خطري کان ڪيئن بچجي؟
هن وقت، ڪيترائي ٺاهيندڙ گرانڊ ٽائيپ پي سي آر ٽيوب کي نيوڪلڪ ايسڊ ريڪشن ٽيوب طور چونڊيندا آهن، جنهن کي رگڙ ذريعي بند ڪيو ويندو آهي، ۽ متغير درجه حرارت جي خراب ٿيڻ ۾ گرمي پد جي خراب ٿيڻ واري درجه حرارت پي سي آر ايمپليفيڪشن 90 درجا تائين پهچندي آهي.
سينٽي گريڊ.گرمي سان توسيع جو بار بار عمل ۽ سردي سان ٺهڪندڙ پي سي آر ٽيوب کي سيل ڪرڻ لاءِ هڪ وڏو چيلنج آهي، ۽ غدود جي قسم پي سي آر ٽيوب ليڪيج سبب نسبتاً آسان آهي.

اهو بهتر آهي ته رد عمل کي مڪمل طور تي سيل ٿيل کٽ/ٽيوب سان اپنائڻ لاءِ رد عمل جي پيداوار جي رسي کان بچڻ لاءِ.اهو بلڪل صحيح ٿيندو جيڪڏهن نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ ان کي ڳولڻ لاءِ مڪمل طور تي سيل ٿيل کٽ تي ڪم ڪيو وڃي.

تنهنڪري نيو ٽيڪ جي نئين مڪمل طور تي خودڪار نيوڪلڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ ڳولڻ واري مشين ۾ مٿيان پنج بهترين چونڊون آهن.